注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:錦鯉皰疹病毒PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:Koi Herpesvirus(KHV)PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
錦鯉皰疹病毒PCR檢測試劑盒多少錢原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
烏頭原堿英文名: Aconine 英文別名: Jesaconine CAS登錄號: 509-20-6 分子式: C25H41NO9 分子量: 499.59
桃葉珊瑚苷英文名: Aucubin 英文別名: Aucubine; Aucubosid; Aucuboside; Rhimantin CAS登錄號: 479-98-1 分子式: C15H22O9 分子量: 346.33
鼠尾草酸英文名: Carnosic acid 英文別名: RoseOx; Salvin CAS登錄號: 3650-09-7 分子式: C20H28O4 分子量: 332.43
鹽酸巴馬汀中文別名: 黃藤素;棕櫚堿 英文名: Palmatine hydrochloride 英文別名: Fibrauretin CAS登錄號: 10605-02-4 分子式: C21H22NO4Cl
羌活醇英文名: Notopterol 英文別名: 7H-Furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one, 4-[[(2E)-5-hydroxy-3,7-dimethyl-2,6-octadienyl]oxy]- (9CI) CAS登錄號: 88206-46-6 分子式: C21H22O5 分子量: 354.40
酚-7-O-葡萄糖苷中文別名: 山柰酚-7-O-葡萄糖苷; 山-7-O-β-D-葡萄糖苷 英文名: Kaempferol-7-O-β-D-glucopyranoside 英文別名: Kaempferol 7-glucoside; Kaempferol 7-monoglucoside CAS登錄號: 16290-07-6 分子式: C21H20O11
去甲澤拉木醛中文別名: 去甲澤拉木醇 英文名: Demethylzeylasteral 英文別名: A-Friedo-24-noroleana-1,3,5(10),7-tetraen-29-oic acid CAS登錄號: 107316-88-1 分子式: C29H36O6
秦皮乙素中文別名: 6,7-二羥基香豆素 英文名: 6,7-Dihydroxycoumarin 英文別名: Cichorigenin;Esculetin CAS登錄號: 305-01-1 分子式: C9H6O4
秦皮素中文別名: 秦皮亭;白蠟樹內(nèi)酯 英文名: Fraxetin 英文別名: Fraxetol CAS登錄號: 574-84-5 分子式: C10H8O5
秦皮甲素英文名: Esculin 英文別名: 6,7-Dihydroxycoumarin;6-glucoside hydrat CAS登錄號: 531-75-9 分子式: C15H16O9•xH2O 分子量: 340.28
七葉膽苷XVII英文名: Gypenoside XVII 英文別名: β-D-glucopyranoside deriv.; Gynosaponin S CAS登錄號: 80321-69-3 分子式: C48H82O18 分子量: 947.15
錦鯉皰疹病毒PCR檢測試劑盒多少錢CBZ-L-谷氨酰胺,100gBromochloromethane 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CBZ-L-谷氨酰胺,25g2,2-Bis(hydroxymethyl)propionic acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%
CBZ-L-谷氨酰胺,500gH-D-MET-OME HCL 質(zhì)量規(guī)格:>98%,廣譜HDAC抑制劑
CBZ-L-天冬酰胺,100gTriethylphosphine 質(zhì)量規(guī)格:>98%
CBZ-L-天冬酰胺,25gNA 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CBZ-L-天冬酰胺,5g3-Hydroxyphenylacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CBZ-L-谷氨酸,100gJ acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CBZ-L-谷氨酸,25gp-Nitrobenzoic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,GPR40激動劑
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