注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:乳酸乳球菌PCR檢測試劑盒多少錢
英文名稱:Lactococcus lactis PCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
乳酸乳球菌PCR檢測試劑盒多少錢原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
短葶山麥冬皂苷C英文名: Liriope muscari baily saponins C CAS登錄號: 87480-46-4 分子式: C44H70O17 分子量: 871.0 分子結(jié)構(gòu):
冬凌草甲素英文名: Oridonin CAS登錄號: 28957-04-2 分子式: C20H28O6 分子量: 364.43 分子結(jié)構(gòu):
丹酚酸A中文別名: 丹參酚酸A 英文名: Salvianolic acid A 英文別名: Dan phenolic acid A; Salvianolic acid CAS登錄號: 96574-01-5 分子式: C26H22O10
丹參素鈉英文名: Sodium Danshensu 英文別名: 3,4-Dihydroxyphenyl-.alpha.-hydroxypropanoic acid sodium salt CAS登錄號: 67920-52-9 分子式: C9H10O5•Na 分子量: 221.04
丁香酚英文名: Eugenol 英文別名: Allylguaiacol; Bioxeda; Caryophyllic acid; Dentogum; Eugenic acid CAS登錄號: 97-53-0 分子式: C10H12O 分子量: 164.20
丹酚酸B中文別名: 丹參酚酸B 英文名: Salvianolic acid B 英文別名: Dan Shen Suan B; Danfensuan B; Lithospermic acid B CAS登錄號: 115939-25-8 分子式: C36H30O16
大豆苷中文別名: 大豆甙 英文名: Daidzin 英文別名: Daidzein 7-glucoside; Daidzoside CAS登錄號: 552-66-9 分子式: C21H20O9
蟲草素英文名: Cordycepin 英文別名: 9-(3-Deoxy-β-D-ribofuranosyl)adenine; 9-Cordyceposidoadenine CAS登錄號: 73-03-0 分子式: C10H13N5O3 分子量: 251.24
橙皮苷中文別名: 橙皮甙 英文名: Hesperidin 英文別名: Atripliside B; Cirantin; Hesperidoside CAS登錄號: 520-26-3 分子式: C28H34O15
大黃酸英文名: Rhein 英文別名: Rheic acid; Rheinic acid; Rhubarb yellow CAS登錄號: 478-43-3 分子式: C15H8O6 分子量: 284.22
百兩金素中文別名: 百兩金皂苷A 英文名: Ardisiacrispin A 英文別名: Deglucocyclamin;Saxifragifolin B CAS登錄號: 23643-61-0 分子式: C52H84O22
乳酸乳球菌PCR檢測試劑盒多少錢N-芐基甘氨酸乙酯,500gMAGNESIUM MONOPEROXYPHTHALATE HEXAHYDRATE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯,100gPropylthiouracil 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯,25gBOC-BETA-IODO-ALA-OME 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標準品
N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯,5gMagnesium fluosilicate 質(zhì)量規(guī)格:>98%
氨基酸螯合鐵,100gN,N-Dimethylcapramide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
氨基酸螯合鐵,25gSILICA 質(zhì)量規(guī)格:>98%
DL-高半胱氨酸,1gIsopropyl acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%
DL-高半胱氨酸,5g(S)-(-)-2,2'-Bis(diphenylphosphino)-1,1'-binaphthyl 質(zhì)量規(guī)格:大于98%,化學純
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