運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 杜氏利什曼蟲(chóng)黑熱病病原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Leishmania donovani()PCR |
分類(lèi) | PCR檢測(cè)試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1杜氏利什曼蟲(chóng)黑熱病病原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
3-氨基丁酸/DL-3-氨基正丁酸/DL-3-氨基丁酸/DL-β-氨基丁酸/DL-β-氨基酪酸/DL-3-氨基-N-丁酸/DL-3-氨基-2-甲基丙酸/3-Aminobutanoic acidBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2835-82-7RT
3-氨基異丁酸/DL-3-氨基異丁酸/DL-3-Aminoisobutyric acidBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,144-90-1RT
2-氨基異丁酸/DL-α-氨基異丁酸/2-甲基丙氨酸/α-氨基異丁酸/2-氨基異酷酸/DL-2-甲基丙氨酸/2-Aminoisobutyric AcidBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,62-57-7RT
DL-精氨酸/鹽酸DL-精氨酸/DL-Arginine HC1BR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,32042-43-6RT
L-精氨酸L-天冬氨酸鹽/L-精氨酸L-天門(mén)冬氨酸/L-精氨酸-L-天冬氨酸/L-精氨酸L-門(mén)冬氨酸鹽/精氨酸門(mén)冬氨酸/精氨酸天冬氨酸鹽/L-Arginine L-aspartate saltBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7675-83-42~8℃
L-精氨酸L-谷氨酸鹽/L-精氨酸-L-谷氨酸鹽/精氨酸谷氨酸/L-谷氨酸L-精氨酸鹽/L-Arginine L-glutamate saltBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,4320-30-3保存:-20℃
L-精氨酸乙酯酸鹽/L-精氨酸乙酯鹽酸鹽/L-Arginine ethyl ester dihydrochlorideBR,98.5%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,36589-29-4保存:-20℃
L-賴(lài)氨酸L-谷氨酸鹽/L-賴(lài)氨酸-L-谷氨酸/賴(lài)氨酸谷氨酸/賴(lài)氨酸谷氨酸鹽/L-Lysine L-glutamate saltBR,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,5408-52-6保存:-20℃
L-鳥(niǎo)氨酸L-天冬氨酸鹽/L-鳥(niǎo)氨酸L-天門(mén)冬氨酸鹽/L-鳥(niǎo)氨酸-L-門(mén)冬氨酸鹽/鳥(niǎo)氨酸門(mén)冬氨酸/ L-Ornithine L-aspartate saltBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3230-94-22~8℃
D-半胱氨酸/(S)-2-氨基-3-巰基丙酸/D-CysteineBR,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,921-01-7RT
D-半胱氨酸鹽酸一水化合物/D-β-巰基丙氨酸鹽酸鹽/D-Cysteine hydrochloride monohydrateBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,32443-99-5RT,避光
L-賴(lài)氨酸醋酸/L-醋酸賴(lài)氨酸/L-2,6-二氨基己酸醋酸鹽/L-Lysine acetate saltBR,98.5%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌, 57282-49-2RT,避光
D-苯甘氨酸/(R)-α-氨基/D(-)-α-氨基酸/D-(-)-α-苯基甘氨酸/(S)-(+)-2- 苯基甘氨酸/D-PhenylglycineBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,875-74-1RT
DL-正纈氨酸/DL-2-氨基正戊酸/DL-戊氨酸/DL-2-氨基戊酸/DL-NorvalineBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,760-78-1RT
杜氏利什曼蟲(chóng)黑熱病病原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格十二烷(同分異構(gòu)體混合物),500mlKerosene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
1-戊硫醇,5ml2,6-Naphthalenedisulfonic acid disodium salt 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品
1-戊硫醇,500ml10,10-Oxybisphenoxarsine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
1-戊硫醇,25mlPotassium L-lactate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
1-戊硫醇,100ml1,2-BIS(DIPENTAFLUOROPHENYLPHOSPHINO)ETHANE 質(zhì)量規(guī)格:>98%
DL-丙氨酸,500gNicosulfuron 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
DL-丙氨酸,100g4-Acetamido-2-aminobenzenesulfonic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
五氧化二,500gNA 質(zhì)量規(guī)格:標(biāo)準(zhǔn)品,用于含量測(cè)定
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