技術(shù)特點(diǎn):
1曼氏桿菌通用PCR檢測試劑盒多少錢準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測流程只需3小時(shí)。
4簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6產(chǎn)品僅用于科研高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品名稱 | 曼氏桿菌通用PCR檢測試劑盒多少錢 |
英文名稱 | Mannheimia spp.PCRPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 產(chǎn)品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
運(yùn)輸及保存:
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
維生素C/抗壞血酸/維他命C/L-抗壞血酸/丙種維生素/2,3,4,5,6-五羥基-2-己烯酸-4-內(nèi)酯/VCAR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,50-81-7RT,避光
維生素C鈉/L-抗壞血酸鈉/VC鈉鹽/L(+)-蘇糖型-2,3,4,5,6-五羥基-2-己烯酸-4-內(nèi)酯鈉/維他命C鈉/Sodium ascorbateAR,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,134-03-2RT,避光
β-胡蘿卜素/β-葉紅素/橙黃素/維生素A原/前維生素A/前維生素A/β-caroteneBR,97%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,7235-40-7保存:-20℃
D-生物素/維生素H/輔酶R/生物素/D-促進(jìn)素/維生素B7/VH/D-BiotinBR,99%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,58-85-52~8℃,避光
N-羥基琥珀酰亞胺生物素/N-生物素羥基琥珀酰亞胺酯/(+)生物素-N-琥珀酰亞胺基酯/D-生物素-N-羥基琥珀酰亞胺酯/N-羥基丁二酰亞胺基生物素/N-羥基琥珀酰亞胺基生物素/(+)-生物素-N-羥基琥珀酰亞胺酯/BNHS/NHS-BiotinBR,98%25毫克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,35013-72-0保存:-20℃
維生素A/視黃醇/全反式-視黃醇/維生素甲/3,7-二甲基-9-(2,6,6-*基-1-環(huán)己烯-1-基)-2,4,6,8-壬四烯-1-醇/維生素A醇/視黃素/維生素A1/VABR,97%,油狀1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,68-26-82~8℃,避光
維生素A棕櫚酸酯/維生素A十六酸酯/視黃醇棕櫚酸酯/棕櫚酸視黃酯/Vitamin A palmitateBR,160-180萬U/g5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,79-81-22~8℃,避光
乙酸維生素A/醋酸維生素A/維生素A油醋酸酯/維生素A醋酸酯/視黃醛乙酸鹽/醋酸維他命A/視黃醇乙酸酯/抗感染性維生素乙酸酯/維生素A乙酸酯/Vitamin A acetateBR,32.5萬IU/g25克BASF127-47-9RT,避光
維生素M/葉酸/蝶酰谷氨酸/蝶翅酸酰谷氨酸/維生素BC/N-[4-(2-氨基-4-氧代-6-蝶啶)甲氨基苯甲?;鵠-L-谷氨酸/VM/PGABR,97%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,59-30-32~8℃,避光
維生素K1/葉綠醌/2-甲基-3-植醇基-1,4-萘醌/植物甲萘醌/2-甲基-3-(3,7,11,15-四甲基十六-2-烯基)-1,4-萘醌/VK1BR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,84-80-02~8℃,避光
維生素K3/甲萘醌/2-甲基-1,4萘二酮/2-甲基-1,4-萘醌/2-甲萘醌/β-甲萘醌/2-甲基-1,4-萘酚喹酮/2-甲基-1,4-萘酚喹酮/2甲基萘醌/甲奈醌/VK3BR,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,58-27-5RT,避光
維生素PP/煙酰胺/煙堿酰胺/3-吡啶甲酰胺/尼古丁酰胺/菸酸胺/尼克酰胺/VPPBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,98-92-0RT,避光
維生素E/天然維生素E/生育酚/維他命 E/[2R-[2R*(4R*,8R*)]]-3,4-二氫-2,5,7,8-四甲基-2-(4,8,12-*基十三烷基)-6-色滿醇/(+)-5,7,8-*基母育酚/2,5,7,8-四甲基-2-(4’,8’,12’-*基十三烷基)-6-色滿醇醋酯/維他命戊/VEBR,50%10克BASFCAS:59-02-92~8℃,避光
維生素E油/VE油/±)-α-生育酚/產(chǎn)妊酚/(±)-5,7,8-*基母育酚/DL-α-生育酚/3,4-二氫-2,5,7,8-四甲基-2-(4,8,12-*基十三烷基)-6-色滿醇/DL-α-抗不育維生素/DL-α-維生素E/維它命E油/VEBR,98%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,10191-41-02~8℃,避光
曼氏桿菌通用PCR檢測試劑盒多少錢H-ILE-NH2 HCL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
1-Indanamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Lead oxide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-Bromo-4-methylaniline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
AURANTIO-OBTUSIN 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Isosorbide 5-mononitrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
4-Penten-1-ol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
Zinc acetate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
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