參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):綿羊莫拉菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
英文名稱(chēng):Moraxella ovisPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?綿羊莫拉菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
1,2,3-三溴丙烷/均三溴丙烷/1,2,3-TribromopropaneCP,97%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:96-11-7RT
1,1,3,3-四乙氧基丙烷/丙二醛乙縮醛/丙二醛雙(縮二乙醇)/丙二醛二乙縮醛/丙二醛縮雙(二乙醇)/1,1,3,3-TetraethoxypropaneBR,97%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,122-31-62~8℃
二安替比林甲烷/4,4′-亞甲基二安替比林/二安替吡啉甲烷/1,1’-二安替比林甲烷/4,4’-次甲基二安替比林甲烷/二(1-苯基-2,3-二甲基-5-吡唑酮)甲烷/4,4’-亞甲基雙(1,2-二氫-1,5-二甲基-2-苯基)-3H-吡唑啉-3-酮/DAPM/DAMAR100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1251-85-0RT
二苯基甲烷/雙苯甲烷/二苯甲烷/1,1'-亞甲基二苯/芐基苯/人造香葉油/二苯基氧樹(shù)脂/DiphenylmethaneCP250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,101-81-5RT
三苯基甲烷/1,1’,1’’-次甲基三苯/三苯甲烷/三芳甲烷系/TriphenylmethaneCP25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,519-73-3RT
十氫萘/萘烷/雙環(huán)(4.4.0)癸烷/十氫化萘/全氫化萘/DecahydronaphthaleneAR,99.5%500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,91-17-8RT
1-溴代庚烷/1-溴庚烷/正庚基溴/溴代庚烷/1-溴代正庚烷/溴庚烷/1-BromoheptaneCP,98%50毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,629-04-9RT
1-溴代辛烷/1-溴代正辛烷/溴辛烷/1-溴辛烷/溴代辛烷/辛基溴/1-溴正辛烷/正辛基溴/溴代正辛烷/1-溴代辛烷/1-BromooctaneCP,98%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,111-83-1RT,避光
溴代十六烷/十六烷基溴/溴代鯨蠟烷/鯨蠟基溴/1-溴代十六烷/1-溴十六烷/正十六烷基溴/1-溴正十六烷/1-BromohexadecaneCP,98%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,112-82-3RT
氯代十六烷/1-氯十六烷/正十六烷基氯/鯨蠟基氯/氯代鯨蠟烷/1-ChlorohexadecaneAR,95%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:4860-03-1RT
碘代十六烷/1-碘十六烷/碘十六烷/碘鯨蠟烷/1-碘代十六烷/十六烷基碘/碘代鯨蠟烷/1-iodo-HexadecaneBR100毫升EMK820735原裝544-77-4RT,避光
氯代癸烷/1-氯癸烷/癸基氯/氯代正癸烷/1-氯代癸烷/氯化癸烷/氯癸烷/1-ChlorodecaneBR,97%50毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1002-69-3RT
十三烷/正十三烷/三癸烷/TridecaneAR,97%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,629-50-5RT
十四烷/正十四烷/正十四碳烷/TetradecaneAR,97%100毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,629-59-4RT
綿羊莫拉菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格TRIS(4-METHOXYPHENYL)PHOSPHINE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
N-Methylcaprolactam 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Sodium 3-mercaptopropanesulphonate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
3-methylthiazolidine-2-thione 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
METHYL VINYL ETHER/MALEIC ACID COPOLYMER 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Polyamine N7 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
2,2'-Dibromodiethyl ether 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2,4,4,6-TETRABROMO-2,5-CYCLOHEXADIENONE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
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