運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
產(chǎn)品名稱 | 絲狀支原體簇PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián) |
英文名稱 | Mycoplasma mycoides clusterPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1絲狀支原體簇PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
β-萘乙中文名稱: β-萘乙其他名稱: 2-萘乙;β-萘醋英文名稱: β-Naphthaleneacetic acid其他名稱: 2-Naphthylacetic acid產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 5克/25克/100克
多效唑中文名稱: 多效唑其他名稱:丁唑英文名稱: Paclobutrazol其他名稱: PP333;α-tert-Butyl-β-(4-chlorobenzyl)-1H-1,2,4-triazole-1-ethanol產(chǎn)品規(guī)格: 高純,98%包 裝: 100克
三十醇其他名稱: 1-三十醇;蜂花醇;正三十醇;三十醇;1-羥基三十;蜂花醇英文名稱: Triacontanol其他名稱: Melissyl alcohol;1-Hydroxytriacontane;Triacon-10產(chǎn)品規(guī)格: 試劑級(jí),92%包 裝: 5克/25克CAS號(hào):593-50-0
馬來(lái)酰肼英文名稱: Maleic Hydrazide其他名稱: 3,6-Dihydroxypyridazine;3,6-Pyridazinediol;Maleic acid hydrazide產(chǎn)品規(guī)格: 高純,99%包 裝: 250克CAS號(hào):123-33-1C4H4N2O2=112.09
馬來(lái)酰肼鉀鹽英文名稱: Maleic hydrazide potassium salt其他名稱: cis-Butenedioic acid Potassium hydrogenmaleate;Toxilic acid;Maleic acid potassium salt產(chǎn)品規(guī)格: 高純,99%包 裝: 250克CAS號(hào):689-82-7C4H4N2O2K=151.19
二基羰酰二肼英文名稱: Diphenylcartazide其他名稱: 1,5-Diphenylcarbazide;1,5-Diphenylcarbohydrazide產(chǎn)品規(guī)格: AR包 裝: 25克CAS號(hào):140-22-7C13H14N4O=242.28
甜菜堿鹽鹽其他名稱: 鹽甜菜堿;*銨乙內(nèi)酯鹽鹽;甘氨*內(nèi)鹽鹽鹽英文名稱: Betaine HC1其他名稱: 1-Carboxy-N,N,N-trimethylmethanaminium chloride產(chǎn)品規(guī)格: 超純,99%包 裝: 100克/500克CAS號(hào):590-46-5
無(wú)水甜菜堿其他名稱: 甜菜素;*銨乙內(nèi)酯;甘氨*內(nèi)鹽;*基甘氨英文名稱: Betaine其他名稱: Methanaminium;2-(Trimethylammonio)ethanoic acid hydroxide inner salt; (Carboxymethyl)trimethylammonium hydroxide inner salt;Glycine betaine;Trimethylammonioacetate產(chǎn)品規(guī)格: 超純,99%包 裝: 100克CAS號(hào):107-43-7
絲狀支原體簇PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)FMOC-b-Ala-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Tetrahydrofurfuryl methacrylate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,特異性的p110β抑制劑
Tris(4-bromophenyl)amine 質(zhì)量規(guī)格:TLC法檢查
Pinacolone 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
2-Benzothiazolamine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
Nitrotetrazolium blue chloride 質(zhì)量規(guī)格:TLC法檢查
4-Fluorobenzeneboronic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Hexamethyldisilazane 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用
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