運(yùn)輸及保存:
產(chǎn)品僅用于科研低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
產(chǎn)品名稱 | 豬輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒多少錢 |
英文名稱 | Porcine rotavirus RTPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
技術(shù)特點(diǎn):
1豬輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒多少錢準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測流程只需3小時(shí)。
4產(chǎn)品僅用于科研簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
聚甲基丙烯甲酯其他名稱: 聚(甲基丙烯甲酯);2-甲基-2-丙烯甲酯的均聚物;聚丙烯酯塑料;有機(jī)玻璃;牙托粉英文名稱: PMMA其他名稱: Poly(methyl methacrylate);Poly(methacrylic acid methyl ester)產(chǎn)品規(guī)格: 特定級(jí)包 裝: 100克/500克CAS號(hào):9011-14-7
檸檬三丁酯其他名稱: 構(gòu)緣三丁酯;2-羥基丙三羥三丁酯;檸檬三正丁酯;2-羥基-1,2,3-丙三羧三丁基酯;2-羥基丙羧三丁酯英文名稱: Tributyl Citrate其他名稱: n-Butyl citrate;Citroflex 4產(chǎn)品規(guī)格: 色固包 裝: 25毫升產(chǎn)品規(guī)格: CP,99%
檸檬三乙酯其他名稱: 構(gòu)緣三乙酯;檸檬三正乙酯;2-羥基-1,2,3-丙三羧三乙酯英文名稱: Triethyl Citrate其他名稱: Ethyl citrate產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 250毫升/1升CAS號(hào):77-93-0
乙酰檸檬三丁酯其他名稱: 乙?;鶛幟术ト□?;乙?;』鶛幟术?;叔丁基-鄰乙?;鶛幟术?;2-(乙酰基)-1,2,3-丙三羧三丁基酯;O-乙?;鶛幟嗜□ビ⑽拿Q: Acetyl tributyl citrate其他名稱: Tributyl 2-acetylcitrate;Tributyl o-acetylcitrate產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 100毫升/500毫升CAS號(hào):77-90-7
甲基丙烯羥乙酯其他名稱: 甲基丙烯-2-羥乙酯英文名稱: HEMA其他名稱: 2-Hydroxyethyl methacrylate;Ethylene glycol methacrylate;Glycol methacrylate產(chǎn)品規(guī)格: BR,96%包 裝: 100克/500克CAS號(hào):868-77-9
磷二鈉英文名稱: Disodium phenyl phosphate hydrate其他名稱: Phenyl phosphate disodium salt hydrate產(chǎn)品規(guī)格: CP,85%包 裝: 25克CAS號(hào):3279-54-7C6H5Na2O4P•xH2O=218.06(anhy)
吖啶中文名稱: 吖啶其他名稱: 茚;氮蒽;9(10H)吖啶;9-吖啶;9(10H)蒽醇英文名稱: Acridone其他名稱: 9-Acridone;9(10H)-Acridone;9,10-Dihydro-9-oxoacridine產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 1克/5克/25克/100克
XTT 鈉鹽其他名稱: 3,3'-[1-(氨酰基)-3,4-四氮唑]-二(4-甲氧基-6-硝基)鈉英文名稱: XTT sodium salt其他名稱: Sodium 2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide inner salt;Sodium 3,3'-[1-(phenylamino)carbonyl]-3,4-tetrazolium-bis(4-methoxy-6-nitro)benzenesulfonic acid產(chǎn)品規(guī)格: 超純,90%包 裝: 50毫克/250毫克CAS號(hào):111072-31-2
豬輪狀病毒通用PCR檢測試劑盒多少錢3-Methylcatechol 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
Zearalenone 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(N)
Fmoc-O-benzyl-L-serine 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(N)
2,4-Dichlorotoluene 質(zhì)量規(guī)格:
Hydrazine hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(N)
6-Chloro-2-fluoropurine 質(zhì)量規(guī)格:
2-Ami,3,4-thiadiazole 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
BOC-ARG(MTS)-OH CHA 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
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