產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 產(chǎn)品僅用于科研即開(kāi)即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 普羅威登斯菌通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián) |
英文名稱(chēng) | Providencia spp.PCR |
分類(lèi) | PCR檢測(cè)試劑盒 |
運(yùn)輸及保存:
普羅威登斯菌通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,產(chǎn)品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
焦磷四芐酯其他名稱(chēng): 焦磷四芐基酯英文名稱(chēng): Tetrabenzyl pyrophosphate其他名稱(chēng): Pyrophosphoric acid tetrabenzyl ester;Tetrabenzyl diphosphate產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 1克/5克/25克CAS號(hào):990-91-0
3-吲哚甲中文名稱(chēng): 3-吲哚甲其他名稱(chēng): 吲哚-3-甲;3-基吲哚;1H-吲哚-3-甲;3-甲吲哚英文名稱(chēng): Indole-3-carboxaldehyde其他名稱(chēng): 3-Indolealdehyde;1H-Indole-3-carboxaldehyde產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 5克/25克/100克/500克
甲基異丙基甲中文名稱(chēng): 甲基異丙基甲其他名稱(chēng): 3-甲基-2-??;3-甲基丁;1,1-二甲基丙;甲基異丙基;異丙基甲基甲;3-甲-2-丁英文名稱(chēng): MIPK其他名稱(chēng): 3-Methyl-2-butanone;Isopropyl methyl ketone;Methyl isopropyl ketone產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包 裝: 250毫升
十九甲酯其他名稱(chēng): 正十九甲酯;十九甲酯;十九碳甲酯;十九基甲酯英文名稱(chēng): Methyl nonadecanoate其他名稱(chēng): Nonadecanoic acid methyl ester產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 1克/5克CAS號(hào):1731-94-8
嘧啶其他名稱(chēng): 間(二)氮;間二嗪;2-氨基-4-甲氧基嘧啶;2-甲硫基嘧啶;嘧啶堿英文名稱(chēng): Pyrimidine其他名稱(chēng): 1,3-Diazine;Metadiazine產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%包 裝: 5克/25克CAS號(hào):289-95-2
3-氨基-1,2-丙二中文名稱(chēng): 3-氨基-1,2-丙二其他名稱(chēng): 3-氨基-1,2-丙二醇;1-氨基-2,3-丙二醇;3-氨基甘油;2,3-二羥基氨;2,3-二羥基丙;3-氨基-1,2-丙二醇;氨基丙二醇英文名稱(chēng): 3-Ami,2-propanediol其他名稱(chēng): 1-Amino-2,3-propanediol產(chǎn)品規(guī)格: AR,97%包 裝: 5克/25克/100克/500克
鄰羥基芐醇其他名稱(chēng): 2-羥基甲醇;水楊醇;鄰羥基甲醇;2-羥基芐醇英文名稱(chēng): Salicyl alcohol其他名稱(chēng): Saligenin;2-Hydroxybenzyl alcohol產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%包 裝: 25克/100克/500克CAS號(hào):90-01-7
1-基-1,2-丙二中文名稱(chēng): 1-基-1,2-丙二其他名稱(chēng): 甲基基乙二;1--1,2-丙二;乙甲英文名稱(chēng): Acetyl benzoyl其他名稱(chēng): 1-Phenyl-1,2-propanedione產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%包 裝: 1克/5克/25克
普羅威登斯菌通用PCR檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)Sodium dichloroacetate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
2-Nitrobenzoic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
Potassium dihydrogen phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
DIMETHYLPHENYLPHOSPHINE 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)
201 Pink support 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)(T)
Sodium selenite 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
CYCLEANINE 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
2,4-Dichlorophenol 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
技術(shù)特點(diǎn):
1產(chǎn)品僅用于科研準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
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