注意事項:
1)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
2)對于生長緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長速度。
3)對于生長不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細(xì)胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)
英文名稱:3T6-Swiss albino mouse embryo fibroblasts
培養(yǎng)基:DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
產(chǎn)品運輸:免費快遞
產(chǎn)品包裝:瓶裝
產(chǎn)品用途:細(xì)胞培養(yǎng)研究
操作說明:
1)對于常溫運輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運輸問題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時間一般為6-12小時后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說明書的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過郵件發(fā)送給我們做及時狀態(tài)跟蹤。
2)對于干冰運輸?shù)募?xì)胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。
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收到3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)后的處理:
1)收到細(xì)胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無縫隙,裂痕)。
2)顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長狀況,有無細(xì)胞漂浮。
3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。
4)打開瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。
5)將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中(若細(xì)胞漂浮嚴(yán)重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個大離心管中,留一點吹打細(xì)胞沉淀成懸液,回收細(xì)胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴(yán)重,亦離心一下。
6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補加自己新配的培養(yǎng)基至適當(dāng)容積,例如4ml,讓細(xì)胞適應(yīng)一下環(huán)境。 當(dāng)細(xì)胞長到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。
L-環(huán)己基甘氨酸L-alpha-Cyclohexylglycine
N-Boc-N'-芐氧基-L-組氨酸N-Boc-N'-benzyloxymethyl-L-histidine
乙醇酸酯Methyl glycolate
N-叔丁氧羰基-1,4-丁tert-Butyl N-(4-aminobutyl)carbamate
間氧基對4-Fluoro-3-phenoxybenzaldehyde
木通皂甙 DAkebia saponin D
十烷基三基溴化銨Decyltrimethylammonium bromide
四化鈦Titanium tetrachloride
3-正十六烷基噻吩3-HEXADECYLTHIOPHENE
4-丙酰羥酸2-Propenoic acid,4-benzoylphenyl ester
3,4-二咖啡???1S,3R,4R,5R)-3,4-Bis[[(E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)prop-2-enoyl]oxy]-1,5-dihydroxycyclohexane-1-carboxylic acid
鄰二酸丁芐酯Butyl benzyl phthalate
1-芐氧羰基嗪tert-Butyl 1-piperazinecarboxylate
三乙酸Sodium trifluoroacetate
甘氨酸培養(yǎng)基Glycine Medium
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細(xì)胞培養(yǎng)PLRP1/PNLIPRP1 胰脂肪酶相關(guān)蛋白1抗體 * 0.1ml Tadalafil
BMP15 骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體 * 0.1ml 17-AAG
BCAT1 胞漿支鏈基轉(zhuǎn)酶抗體 * 0.1ml 17-AAG
BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 * 0.1ml Terazosin HCl
Hepatic lipase 肝脂酶抗體 * 0.2ml Testosterone
GABA Transporter 1/GAT-1 γ基運載蛋白1抗體 * 0.1ml Testosterone
PAPPA 相關(guān)血漿蛋白A抗體 * 0.1ml Tetracaine HCl
PPT1 棕櫚酰蛋白酯酶1抗體 * 0.2ml Tetracaine HCl
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