?技術(shù)原理:
產(chǎn)品僅用于科研DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
產(chǎn)品名稱:番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因PCR試劑盒
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
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注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
儲(chǔ)存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
桃色歐文氏菌 種屬:Erwiniapersicina 安全等級(jí) 1模式菌株 no
丁香假單胞菌 種屬:Pseudomonassyringae 安全等級(jí) 1模式菌株 no
白色噬瓊膠菌 種屬:Agarivoransalbus 安全等級(jí) 1模式菌株 no
假交替單胞菌 種屬:Pseudoalteromonasnigrifaciens 安全等級(jí) 1模式菌株 no
鼠李糖乳桿菌 種屬:Lactobacillusrhamnosus 安全等級(jí) 1模式菌株 no
雙歧雙歧桿菌 種屬:Bifidobacteriumbifidum 安全等級(jí) 1模式菌株 no
噬糖鹽紅菌 種屬:Halorubrumsaccharovorum 安全等級(jí) 1模式菌株 no
白鬼筆 種屬:Phallus impudicus 描述 菌蓋近鐘形,具有紋格或皺紋,上面有灰黑色臭粘液。淺紅至桔紅色,頂部端平,有一小孔口。菌柄海綿狀,圓柱形,中空,近基部粉紅或白色。菌托較厚,白色;菌蓋近鐘形,具有紋格或皺紋,上面有灰黑色臭粘液。孢子橢圓形,4.5~5×2~2.5微米,光滑,無(wú)色。
白黃側(cè)耳(姬菇) 種屬:Pleurotus cornucopiae 描述 純白色,平滑,直徑4-13cm,中部平或凸起 純白色,長(zhǎng)3-4cm,粗1-3cm 白色,變淡肉粉色或淡紅褐色,有時(shí)皺曲 橢圓形,10.8-14×4.8-6μm 2-4小梗。
蛹蟲(chóng)草 種屬:Cordyceps militaris 描述 子座單個(gè)或數(shù)個(gè)從寄主頭部生長(zhǎng)出,有時(shí)蟲(chóng)體節(jié)部發(fā)出,橙黃色,一般不分枝,有時(shí)分枝,高3-5cm。頭部呈棒狀,長(zhǎng)1-2cm,粗3-5mm,粗糙表面。子囊殼外露,近圓錐形,下部埋生于頭部的外層,400-300μm×4-5μm,內(nèi)含8枚線形孢子。孢子細(xì)長(zhǎng),幾乎充滿子囊,粗約1μm,成熟時(shí)產(chǎn)生橫隔,并斷成2-3μm長(zhǎng)的小段。子座柄部近圓柱形,長(zhǎng)2.5-4cm,粗2-4mm,內(nèi)實(shí)心。
黑木耳 種屬:Auricularia auricula-judae 描述 子實(shí)體滑或略有皺紋,紅褐色或棕褐色,干后變深褐色或黑褐色。外面有短毛,青褐色。擔(dān)子細(xì)長(zhǎng), 柱形, 有三個(gè)橫隔, 50~65μm×3.5~5.5μm。孢子無(wú)色,光滑,常彎曲,臘腸形,9~(16)17.5μm×5~7.5μm。
趙子蘑 種屬:Agaricus sp. 描述 菌絲色澤潔白,在瓊脂斜面培養(yǎng)基上呈絨毛狀生長(zhǎng),又濃又厚,長(zhǎng)速快,深入基質(zhì)內(nèi)部菌絲較少較淺。
草地菇 種屬:Agaricus sp. 描述 菌絲色澤潔白,在瓊脂斜面培養(yǎng)基上呈絨毛狀生長(zhǎng),又濃又厚,長(zhǎng)速快,深入基質(zhì)內(nèi)部菌絲較少較淺。
膠韌革菌(榆耳) 種屬:Gloeostereum incarnatum 提供形式 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí) 1模式菌株 no
番茄內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)LAT52基因PCR試劑盒巨噬細(xì)胞炎癥因子1β 抗體 MIP-1β,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體 MIP-1α,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨噬細(xì)胞炎性蛋白抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨噬細(xì)胞炎性蛋白MIP-3a抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
Anti-Kir7.1 (extracellular) Kir7.1 (胞外)抗體(0.2 ml)
Anti-Kir7.1 (extracellular)-ATTO-488 Kir7.1 (胞外)-ATTO-488抗體(50 ul)
Anti-Kir6.2 Kir6.2抗體(50 ul)
Anti-Kir6.2 Kir6.2抗體(50 ul)
Anti-Kir6.2 Kir6.2抗體(25 ul)
Anti-Kir6.2 Kir6.2抗體(0.2 ml)
Anti-Kir6.2 Kir6.2抗體(0.2 ml)
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