NCI-H157人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

HMEpC-c 人類上皮細(xì)胞(HMEpC) 500,000cells 人神經(jīng)細(xì)胞HN 兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/PE PE標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

FANK1： HSD13蛋白抗體 蚊子幼蟲體細(xì)胞;Aedes albopictus clone C6/36

BC-020(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

Frizzled 2： Wnt信號(hào)受體FZD2蛋白抗體 大鼠背部脊髓神經(jīng)元(RDSCI)(1×106)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM0501 兔子可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 Kappa light chain/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

9-Mar： 膜相關(guān)環(huán)指蛋白9抗體 CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CL-0403NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒 BMG/ Beta2-MG  大鼠β2微球蛋白 96T

M2-PK (pyruvate Kinase M2)： 酸激酶-M2 0.1ml

Rhesus antibody Rh FAIM3 FAS凋亡抑制分子3抗體 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));LA1-VAP33-GFP

NEC(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 22RV1(前列腺癌細(xì)胞) 大鼠纖維蛋白肽A(FPA)ELISA試劑盒 TPO-Ab(Mouse anti-Thyroid-Peroxidase antibody)  小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體 中國(guó)倉鼠卵巢細(xì)胞-二氫還原酶缺陷型;CHO/dhFr-

NCI-H157人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞HS-4細(xì)胞，人皮膚癌細(xì)胞系 鼠傷沙門氏菌Ta97 雜交瘤(B類);Z172A4C4C6F3G12 人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA 試劑盒 Glypican 4(Glypican proteoglycan 4) 0脂酰基醇蛋白聚糖-4抗原 0.5mg

HECTD2： E3連接酶抑制素受體2抗體 GLIPR1 Others Human 人 GLIPR1 / RTVP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21 人凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒 GRB2/ASH peptide 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2抗原 0.5mg

HAPLN3： 透明質(zhì)酸及粘蛋白3抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0901

ME-180(人子宮頸表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人凋亡蛋白酶激活因子1(ICAD)ELISA 試劑盒 GZMB/CCPI(Granzyme B) 顆粒酶B抗原 0.5mg

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。