NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

hMNC-CB-c single donorula-pure 臍帶血來(lái)源的人類單核細(xì)胞 人腎小管上皮細(xì)胞HRPTEpiC 兔子TH糖蛋白(THP)ELISA 試劑盒 IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.3ml

FLT-3： FMS樣酪酸激酶3 0.2ml

細(xì)胞角蛋白5抗體 非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1

COLO 201(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 兔子S100蛋白(S-100)ELISA 試劑盒 IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

Phospho-FLT3(Tyr591)： 0酸化FMS樣酪酸激酶3 0.1ml

MCT1： 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體 雜交瘤(B類);C3110D2B2

IL1B Protein Rat 重組大鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白 (mature form) 大鼠細(xì)胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA試劑盒 MIS/AMH) 大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素 96T

Mitochondrial ribosomal protein L11： 線粒體核糖體蛋白L11抗體 EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠細(xì)胞間粘附分子5(ICAM5)ELISA試劑盒 8-OHdG(Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine)  小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷 96T

Myocardin： 促血管平滑肌細(xì)胞分化因子抗體 BT549細(xì)胞，管癌細(xì)胞 人喉癌細(xì)胞,M4e細(xì)胞 大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)

NCI-H520人肺鱗癌細(xì)胞大鼠肝細(xì)胞;IAR20 人單皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA 試劑盒 HPV16-E7/E7 protein(Human papillomavirus type 16) 人類狀瘤病毒16抗原 0.5mg

HLTF： 解旋酶樣轉(zhuǎn)錄因子抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0907

NAMALWA(人Butt's淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人單皰疹病毒Ⅰ型抗體(HSVⅠ-Ab)ELISA 試劑盒 Hpt/HP(haptoglobin) 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白抗原 0.5mg

HMGCS2： 三羥基基合成酶2抗體 腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基MCM

CXCL12 Protein Canine 重組狗 CXCL12 / SDF-1 蛋白 人單皰疹病毒(HSV)ELISA試劑盒 H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原 0.5mg