NIH:OVCAR-8人卵巢癌腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GPA33： 糖蛋白A33抗體 人肝細(xì)胞;QSG-7701 [QSG7701]

HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人細(xì)胞角蛋白19(CK-19)ELISA 試劑盒 IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml

Ghrelin 28： 腦腸肽抗體 AMBP Others Human 人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

小氣道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基SAEpiCM-prf 人細(xì)胞角蛋白18(CK-18)ELISA 試劑盒 IgM/Bio 標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.3ml

GLP-2： 胰高血糖素樣肽-2抗體 大鼠腎系膜細(xì)胞;RMC 骨肉瘤細(xì)胞，U-2 OS細(xì)胞 Walker-256細(xì)胞，大鼠肝癌細(xì)胞(癌細(xì)胞接種到肝臟成瘤)

N-cadherin： N-鈣粘附分子抗體 IL1RAP Others Human 人 IL1R3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CM-H092人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 F VIII Ag(Mouse Factor VIII -related Antigen)  小鼠第八因子相關(guān)抗原 96T

NCoR1： 核受體輔助抑制因子1抗體 大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J

人雪旺細(xì)胞 ( HSC) ( 5×105 ) 小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Mouse 大鼠前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒 u-T4  大鼠高敏甲狀腺素 96T

Nephrin： 腎小球細(xì)胞粘附分子受體抗體 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A

NIH:OVCAR-8人卵巢癌腺癌細(xì)胞Integrin Alpha V + Beta 5： 整合素αVβ5抗體 人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;D341Med

VCaP(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7 犬血栓前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒 Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 轉(zhuǎn)移抑制基因(抗原) 0.5mg

IRF-1： 干擾素調(diào)節(jié)因子1抗體 膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標(biāo)簽) 犬血管性血友病因子(VWF)ELISA試劑盒 Snake poison Protein 蛇毒蛋白 0.5mg

IL-6：  0.1ml

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。