J82人膀胱移行細(xì)胞癌

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Promocell C-23160 Skeletal Muscle Cell GrowthMedium KIT, 骨骼肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基套裝 500ml 小鼠Slit同源物3(Slit3)ELISA試劑盒 SIGLEC9： 唾液酸結(jié)合樣凝集素9抗體 CL-0366IAR20(大鼠肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MSTO-211H(人肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠Slit同源物2(Slit2)ELISA試劑盒 Signal Peptide Peptidase： 信號(hào)肽肽酶SPP抗體 人腸平滑肌細(xì)胞(HISMC)( 5×105 )

人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S 小鼠Slit同源物1(Slit1)ELISA試劑盒 SIM1： 轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體 人肺癌細(xì)胞;A-427 [A427] 大鼠破骨細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

VEGFA Others Human 人 VEGF121b / VEGF-A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 小鼠Slit2(Slit2)ELISA試劑盒 Sin3b： 轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b抗體 人皮膚成纖維樣細(xì)胞;HSF2

CNE-2Z細(xì)胞，人鼻咽癌母系細(xì)胞 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,SP2/0細(xì)胞 恒河猴腎細(xì)胞;RM-1 小鼠Sideroflexin小鼠1蛋白(SFXN1)ELISA試劑盒 SIP1： Smad蛋白相互作用蛋白1抗體 MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

LRP5： 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體 615小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS

HL-60人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞 HL-60 primary human myeloid leukemia cells IMDM(GIBCO)+20%FBS 大鼠載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒 IFN- Gamma (mouse) 小鼠γ干擾素 96T

phospho-LRP5(Thr1492)： 0酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5抗體 LRPAP1 Others Human 人 LRPAP1 / A2MRAP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

小腸隱窩上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠載脂蛋白A5(APOA5)ELISA試劑盒 CTACK/CCL27(Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK)  人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子 96T

phospho-LRP1(Ser4523)： 0酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS

J82人膀胱移行細(xì)胞癌phospho-HDAC2 (Ser394)： 0酸化組蛋白去乙?；?span>2抗體 兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;SMC 白血病細(xì)胞，L1210細(xì)胞 SH2細(xì)胞，小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞

TNFRSF17 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 TNFRSF17 / BCMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人抗狂犬病毒抗體(ai-RV)ELISA 試劑盒 Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原) 0.5mg

phospho-HOMER3 (Thr36)： 0酸化HOMER3蛋白抗體 人少突膠質(zhì)細(xì)胞

IMR-32細(xì)胞，人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 黃桿菌屬 人腦血管平滑肌細(xì)胞RNAHBCSMC miRNA5 μg 人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA 試劑盒 ARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原 0.5mg

HRAS+KRAS： 轉(zhuǎn)化蛋白p21抗體 HA Others H16N3 甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。