HFL-1人胚肺成纖維細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FPGS： 鹽多谷酸合成酶抗體 F11R Others Mouse 小鼠 F11R / JAM-A / JAM-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml 豚鼠白介素1β(IL1β)ELISA試劑盒 IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

FOPNL： 胚胎干細(xì)胞相關(guān)蛋白FOPNL抗體 RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 Rattus

HUASMC-c 人臍動脈平滑肌細(xì)胞(HUASMC) 500,000cells 胃黏膜上皮Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠白介素1β(IL1B)ELISA試劑盒 IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

phospho-Fos B (Ser27)： 0酸化癌基因FOS蛋白B抗體 CM-H096人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SNU-638人胃癌細(xì)胞 Human gasic cancer cells SNU-638 1640+10% FBS 大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒 LDL  大鼠低密度脂蛋白 96T

MAD2： 有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體 PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 Mouse Beta-catenin, Beta-cat  小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白 96T

beta 2 Microglobulin： β2微球蛋白抗體 小鼠黑色素瘤瘤株;B16

NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(胚肺細(xì)胞) 大鼠血管非炎性蛋白1(VNN1)ELISA試劑盒 Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP  小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 96T

HFL-1人胚肺成纖維細(xì)胞HEXO： 3'-5'外切酶1蛋白抗體 牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1) 人胃癌細(xì)胞，NCI-N87細(xì)胞 NS-1細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞

ACVR1 Others Rat 大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)ELISA 試劑盒 Dynamin 2(Anti-Human Dynamin-2 ) 鳥苷三0酸酶-發(fā)動蛋白2抗體 CL-0082F9(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

MuM-2B細(xì)胞，人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞 光孢短柄帚霉 野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA 試劑盒 Nadrin peptide 發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白多肽抗原 0.5mg

HIGD1C： 缺氧誘導(dǎo)基因1C蛋白抗體 SLAMF7 Others Human 人 SLAMF7 / CRACC / CD319 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

小耳豬腎細(xì)胞;SEPfk 人肝癌抗原(PHC)ELISA 試劑盒 E2F1 轉(zhuǎn)錄因子E2F-1 0.5mg