NCI-H1299人非小細胞肺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FAM20C： 胞外分泌型絲酸/蘇酸蛋白激酶FAM20C抗體 人支氣管平滑肌細胞總RNAHBSMC NA

MCF-7(NEW)細胞，人癌細胞 小鼠雜交瘤細胞,ST2/o細胞 HET-1A, 人食管上皮細胞 山羊雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的羊抗雞IgG 0.1ml

Factor VIII B chain： 8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體 PGC Others Human 人 PGC / Gasicsin / Pepsinogen-C 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0416Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 山羊白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的羊抗雞IgG 0.1ml

FGFR substrate 3： 纖維母細胞生長因子受體底物3抗體 293A，人胚腎上皮細胞系(腺病毒包裝級別) Human

Mannose Receptor： 巨噬細胞甘露糖受體抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0183PA317(小鼠成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA 試劑盒 TGF Beta2  大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2 96T

Mucin 5AC： 胃粘液素抗體 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1

RBL-1(大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 PC-3(人前列腺癌細胞) 大鼠同型半胱酸(HA)ELISA試劑盒 MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha)  人巨噬細胞炎性蛋白3α 96T

MMP-20： 基質(zhì)金屬蛋白酶20抗體 人結(jié)直腸腺癌細胞;SW620 [SW 620;SW-620]

NCI-H1299人非小細胞肺癌細胞IFI44L： 干擾素誘導(dǎo)蛋白44樣蛋白抗體 人細胞;Hela

PA317(小鼠成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 人半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒 MMP-26(Matrix metalloproteinase-26) 基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗原 0.5mg

ITGB4： 整合素β4抗體 人尿道上皮細胞HUC

XCL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 XCL1 蛋白 (His 標簽) 人半乳甘露聚糖(GM)ELISA試劑盒 MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原 0.5mg

IGKV A18： kappa輕鏈可變區(qū)抗體 SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。