型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-04
所屬分類(lèi)人源細(xì)胞系
報(bào)價(jià)1500
傳代培養(yǎng)操作步驟:
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度,當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。
(3)根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的,一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。
(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí),再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過(guò)度。
(5)吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,輕輕吹打混勻,使細(xì)胞均勻分散。
(7)用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間,甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
HPT-8人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | HPT-8人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 表皮 |
種屬 | 人 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以?xún)?nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
細(xì)胞規(guī)格 | 1x106cells/T25或1mL凍存管 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ)存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹:
細(xì)胞別稱(chēng) HPT-8;人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞 支原體檢測(cè) 無(wú) 培養(yǎng)基 RPMI-1640+10%FBS+1%雙抗 培養(yǎng)條件 氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃ 凍存條件無(wú)血清凍存液,液氮儲(chǔ) 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/ 凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用) 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說(shuō)明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下:
一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下)。當(dāng)在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)時(shí),即可進(jìn)行傳代。
(1)嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作,所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌,且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上,以免細(xì)胞發(fā)生污染。
(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞,對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存,促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用??筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。
(4)消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少,或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離,這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡,影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
(5)細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠,或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?,?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小,可以提高細(xì)胞活率。
(6)吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生,以免損傷細(xì)胞,影響細(xì)胞狀態(tài)(吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Flotillin 2: 表皮細(xì)胞表面抗原1抗體 人腸平滑肌細(xì)胞RNAHISMC miRNA5 μg
GRC-1細(xì)胞,人腎癌細(xì)胞 鼠纖維肉瘤細(xì)胞系,WEHI 164細(xì)胞 CL-0446SUP-B15(人Ph+急淋白血病細(xì)胞系)5×106cells/瓶×2 兔細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒 Goat Anti-Bovine IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的羊抗IgG 0.5ml
Factor IX: 9抗體 EFNA5 Others Mouse 小鼠 EFNA5 / Ephrin-A5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 兔透明質(zhì)酸(HA)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Bovine IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗IgG 0.1ml
Factor X: 10抗體 H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來(lái)源) Rattus
TNFSF11 Others Mouse 小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠(Pepsin)ELISA 試劑盒 HL(Mouse hepatic lipase) 小鼠肝脂酶 96T
MTGR1: 髓易位基因相關(guān)蛋白1抗體 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(懸浮生長(zhǎng))cDNAHOPC-os cDNA
L W-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 L W-3A mice subcutaneous connective tissue cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS 大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA 試劑盒 UK 大鼠 96T
BBS6: 巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS6抗體 HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0282HO-8910PM(人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠尾加壓素II(Urotensin II) ELISA試劑盒 VCAM-1/CD106(Human Vascuolar cell adhesion molecule 1) 人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 96T
HPT-8人飼養(yǎng)層上皮細(xì)胞Phospho-IRAK1 (Thr209): 0酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0923
NIH/3T3(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 EVI2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人成骨生長(zhǎng)肽(OGP)ELISA 試劑盒 Inhibin beta A peptide 抑制素beta A抗原 0.5mg
Phospho-IRAK1 (Thr387): 0酸化白介素-1受體相關(guān)激酶1抗體 小鼠顆粒細(xì)胞MGC
CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒 Inhibin beta B 抑制素βB抗原 0.5mg
IRF3: 干擾素調(diào)節(jié)因子3 0.1ml
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