HLE人肝癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞RNAHIBEpiC miRNA5 μg 兔固酮(ALD)ELISA試劑盒 Goat Anti-rat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

FNDC1： Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1抗體 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1 小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

CD44 Others Human 人 CD44 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 兔骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 Goat Anti-rat IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

FNDC8： Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白8抗體 人肺間充質(zhì)干細(xì)胞總RNAHPMSC NA

5637(HTB-9)細(xì)胞，人膀胱癌細(xì)胞 大鼠肝癌細(xì)胞(癌細(xì)胞接種到肝臟成瘤),Walker-256細(xì)胞 MLF, 小鼠淋巴成纖維細(xì)胞 兔鉤端IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒 SDF-1 Beta/CXCL12(Human Stromal cell derived factor 1 Beta)  人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β 96T

Phospho-MAP2(Ser136)： 0酸化微管相關(guān)蛋白2抗體 人髓核細(xì)胞裂解物HNPCL

MADB-106大鼠癌細(xì)胞 Breast cancer cells of MADB-106 rats 1640+10% FBS 大鼠晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒 SCFR(Human Stem Cell Factor Receptor)  人干細(xì)胞因子受體 96T

MMRN1： 內(nèi)皮細(xì)胞MMRN1蛋白抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0231TE-1(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE)ELISA試劑盒 Lep IgG(Mouse Leptospira IgG)  小鼠鉤端IgG 96T

HLE人肝癌細(xì)胞Integrin beta 6： 整合素β6/Integrin β6抗體 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

APP-PS1細(xì)胞，人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染細(xì)胞株(HEK293) 宋內(nèi)氏志賀氏菌(Sh.sonnei) 山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA 試劑盒 LIFR/CD118 peptide 白血病抑制因子受體抗原 0.5mg

INPP5F： 0酸肌醇0酸酶蛋白INPP5抗體 NOG Others Human 人 Noggin / NOG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 人補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA 試劑盒 Lingo-1 Nogo受體作用蛋白抗原 0.5mg

IL-4I1： 白細(xì)胞介素4誘導(dǎo)蛋白1抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY1008